艾滋病的诊断和检测
艾滋病是由艾滋病病毒(HIV)感染引发的一种危害极大的传染病,HIV感染人体后一般会迅速找到靶细胞(主要是CD4细胞)并开始大量复制。在急性感染期,感染者体内每立方毫米血液即可检测到数万甚至数十万的病毒拷贝。
近年来,国内外已形成共识:HIV感染应尽早发现,尽早开展治疗。研究证实,HIV携带者即便在高CD4水平下,立即治疗的艾滋病病毒(HIV)感染者也会从中受益。在年6月,我国国家卫生计生委发布《关于调整艾滋病免费抗病毒治疗标准的通知》中将免费抗病毒治疗标准调整为:建议对有治疗意愿的所有艾滋病病毒感染者、患者均实施抗病毒治疗。
所有HIV感染者,无论CD4水平多少,均可接受抗病毒治疗。
艾滋病的预防和控制,尽早确诊HIV感染是关键,可靠及时的HIV检测技术这时候就显得尤为重要。近年来,随着生物检测技术的发展,HIV的检测技术也取得了长足进步。HIV感染者确诊所需要的时间大大缩短,检测的可靠性和可操作性大大得到了提高。现在的HIV检测技术,可分为HIV抗体检测和非HIV抗体检测。
首先讲HIV抗体检测,HIV感染者体内可检测到HIV抗体是HIV/AIDS诊断的一项重要指标。现阶段,主要的HIV抗体检测手段包括:
蛋白印记实验(WB)
WB也被叫做免疫印记实验,通过将要检测的抗原吸引转移到膜上,再用能与其特异结合的抗体检测其存在的技术。WB其特点是准确可靠,通常被用来作为HIV确诊实验。
酶联免疫吸附法(ELISA)
ELISA是检测HIV的一种固相免疫测定技术,需要先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。目前为止,ELISA试剂已经发展到第四代,也就是人们现在所说的抗原抗体联合检测试剂。使用第四代检测试剂检测,HIV感染确诊窗口期可缩短到4~6周。ELISA检测的特点是快速可靠,是目前最常用的HIV筛查方法。
免疫荧光法(IFA)
一种比较早也比较可靠的生物检测技术。其特点是操作简便,敏感性及特异性要比ELISA法高,缺陷是IFA对某些血清非特异性荧光难以去除,仪器价格昂贵,结果判断主观性强。
明胶颗粒凝集试验(PA)
PA是一种快速、简便的HIV血清抗体检测方法,此方法操作简单,无需特殊仪器设备,适合对少量样本的检测,但灵敏度和准确度不如ELISA法。
金标快速反应试验(SPOT)
免疫金标记技术用于快速检测HIV抗体。特点:出结果快,特异性好,快速简便,适用于应急检测以及边远地区检测。
免疫层析/渗滤实验
属于金标法的一种,是近年迅速发展起来检测方法。特点是特异性好,敏感度也较高,适宜于偏远地区临床用血检测。
无创性HIV抗体检测
无创性HIV抗体检测适用人体体液来检测HIV,这些体液的收集避免静脉穿刺,优点是标本来源是无创的,易被接受,尤其是采血困难的人群,缺点是不适合大量样品的同时检测。
HIV感染人体后,人体免疫系统需要经过一段时间的免疫应答才能逐渐产生足量抗体,所以在理论上HIV抗体检测是“滞后的”。随着生物技术的发展,HIV核酸检测手段逐渐得到了人们的认可。
核酸检测
核酸检测可以直接检测HIVRNA,可在发现血清抗体阳转之前检测到HIV感染,而且比P24抗原检测方法更灵敏。目前最新的超灵敏HIV核酸检测技术已经将HIV检测窗口期缩短至3~7天。
HIV核酸检测通常使用PCR和RT-PCR技术,可分为定性检测和定量检测两大类。其特点是可靠灵敏,窗口期大大缩短。缺点是成本较高,难以大范围免费推广。
目前,所有的HIV筛查方法还都存在窗口期的问题,如果HIV检测刚好在窗口期,就有可能出现漏检。HIV检测窗口期包含两个方面的意义:一是此期机体自身是否真正针对HIV产生特异性的体液免疫而产生HIV抗体;二是如果有抗体产生,所使用的抗体检测试剂敏感度不够,仍检测不出抗体,也被归为窗口期。
由于窗口期影响,临床合格的血液在仍存在着传播HIV的风险。
不论是使用血液还是用唾液(口腔黏膜渗出液)或者HIV核酸检测进行初筛,为了提高可靠性、准确率,必须要过了窗口期再测。如果采用HIV核酸检测一般24小时过后就可以做,7天左右就能排除。如果是HIV抗原抗体检测两周后可以做,可基本排除,最终以四周检测为准。单独检测HIV抗体一般建议六周后做,排除一般以八周后结果为准。
全国各区县级疾控医院一般都能提供HIV抗体初筛检测,其中疾控中心HIV检测是免费的,医院提供收费的HIV检测服务,因各地收费标准略有不同,一般在~元区间。如果选择HIV核酸检测,收费一般在0元以上。初筛复筛阳性的个例,还需要进一步确诊,确诊试验只可在部分有资格的省市医院进行。
未完待续
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